固相提取器對于不同的填料保留機制(填料保留目標化合物或雜質),操作略有不同。固相提取通常有四個步驟:
1.填料保留目標化合物
激活-去除小柱中的雜質,創造一定的溶劑環境。
提取前用充滿小柱或5-10的溶劑沖洗小柱ml溶劑沖洗濾膜SPE填料保持濕潤,因為干燥會降低樣品的保留值,不同柱的干燥程度也會影響回收率的再現。首先用甲醇等水溶性有機溶劑清洗填料,因為甲醇可以潤濕吸附劑表面,滲透到非極性硅膠鍵合相中,使硅膠更容易被水潤濕;然后加入水或緩沖液清洗,創造與樣品溶劑兼容的環境,提高回收率。
上樣-用一定的溶劑溶解樣品,轉移到柱上,并將成分保留在柱上。
一般可采用以下四種方法:
(1)用0.1mol/L調整酸或堿,使pH9,離心取上層液萃取;
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白提取清液,用水或緩沖液稀釋后提取;
(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質后,取上清液,調整pH值后萃取;
(4)超聲15min加水,緩沖液,取清液提取。流速應控制在1ml/min,快速流量不利于待測物與固定物的結合。
淋洗----Zda程度去除干擾物。
反相SPE清洗溶劑多為水或緩沖液,可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調節劑pH值。添加小柱的清洗液不得超過小柱的體積,而是SPE濾膜為5~10ml。
洗脫-用小體積溶劑洗脫并收集被測物質。
應選用5~10ml離子強度較弱,但可以清洗待測物體的洗脫溶劑。如果需要較高的靈敏度,可以先將洗脫液揮干,然后用流相重組殘留物,然后取樣。體內樣品洗脫后多含水,可冷凍干燥。保留能力弱SPE填料可用體積小、體積弱的洗脫液清洗待測物體,然后用極性強的洗脫液清洗待測物體HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。
如果待測物可以電離,可以調節pH為了增強待測對象,抑制樣品的離子化SPE洗脫時調整填料時調整pH使其離子化,用弱溶劑洗脫,收集洗脫液后調整pH值使其在HPLC在分析中達到Z的良好分離效果。在洗脫過程中,慢流速,用兩次小體積洗脫代替大體積洗脫,回收率較高。
鼎泰恒勝DTS-240 自動固相萃取儀
產品的獨特優點和亮點:
1.全自動操作模式
固相提取的全過程自動完成:柱活化-上樣-柱淋洗-柱干-柱洗脫,柱切換等功能自動完成,批量樣品處理。
二、雙通道提取
雙品位上樣,可同時激活、上樣、洗脫、干燥;樣品數量可升級為四通道、六通道和八通道。
3.連續處理樣品的能力
單機可連續處理24個樣品,自動更換樣品SPE柱中間不需要人工操作,完全符合自動化要求。
4.全封閉設計
無試劑直接暴露在實驗室環境中,避免實驗室環境污染;樣品等級和收集位置不會從主機中移出,避免碰撞,不需要占用額外的空間。
5、精準控制
柱插桿技術,柱插桿靠近SPE在柱填料上方,設定的液體流量是液體通過SPE柱的流速保證了回收率的平行性。
6、方便快捷
更換不同型號的柱插桿不需要扳手等工具,更快更方便。
7、健全的清洗方案
柱插桿清洗、針清洗、主動排液,樣針具有清洗內外壁的功能。
8.控制大觸摸屏
主機有自己的大觸摸屏,不需要外部計算機控制,操作簡單易懂,可以直接編輯設置方法和呼叫方法,并具有編輯錯誤的智能提醒功能。
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